產(chǎn)品概述：
Thermo Scientific EZ-Link Phosphine-PEG4-Desthiobiotin 是一種聚乙二醇化試劑，其生物素樣基團(tuán)可從鏈霉親和素中洗脫，激活后可用于化學(xué)選擇性連接和純化代謝標(biāo)記的疊氮化物靶標(biāo)。
EZ-Link Phosphine-PEG4-Desthiobiotin 的特點(diǎn)：
? Desthiobiotin — 生物素的類(lèi)似物可以輕松從鏈霉親和素中洗脫，這是親和純化應(yīng)用的理想特性
?化學(xué)選擇性— 膦反應(yīng)基團(tuán)在生物樣品中對(duì)疊氮化物標(biāo)記分子具有特異性，確保特異性標(biāo)記目標(biāo)的捕獲和純化
?兼容—施陶丁格反應(yīng)化學(xué)在簡(jiǎn)單的緩沖條件下有效進(jìn)行；不需要輔助試劑，例如銅或還原劑
? PEG 間隔臂 - 聚乙二醇間隔臂有助于保持標(biāo)記分子的溶解性并降低與親和素、鏈霉親和素或 NeutrAvidin 親和結(jié)合的空間位阻
?可溶性- 易溶于水混溶性溶劑（例如，DMSO）用于隨后在含有細(xì)胞裂解物和其他生物樣品的水性反應(yīng)混合物中稀釋
當(dāng)與疊氮化物標(biāo)記策略結(jié)合使用時(shí)，膦-PEG4-脫硫生物素能夠使用鏈霉親和素樹(shù)脂對(duì)蛋白質(zhì)相互作用和翻譯后修飾進(jìn)行親和純化。膦部分通過(guò)Staudinger 反應(yīng)機(jī)制對(duì)已用生物正交疊氮基團(tuán)標(biāo)記或代謝標(biāo)記的分子。脫硫生物素標(biāo)簽以高特異性與鏈霉親和素和其他生物素結(jié)合蛋白結(jié)合，但在溫和條件下很容易洗脫（即，通過(guò)與常規(guī)、游離生物素的競(jìng)爭(zhēng)性置換）。因此，對(duì)于需要標(biāo)記蛋白質(zhì)的非變性洗脫的親和素-生物素技術(shù)，該試劑是膦-PEG3-生物素（部件號(hào) 88901）的有用替代品。無(wú)稱(chēng)量形式（5 x 1 mg 可重新密封的小瓶）消除了稱(chēng)量少量試劑相關(guān)的困難，并最大限度地保護(hù)未使用的試劑免于降解。
脫硫生物素與生物素
脫硫生物素是一種單環(huán)、無(wú)硫的生物素類(lèi)似物，與鏈霉親和素結(jié)合的特異性幾乎相同，但親和力低于生物素（1/Kd = 10 11vs. 10 15米，分別）。因此，脫硫生物素化的誘餌蛋白及其相互作用的伙伴可以使用基于與游離生物素的競(jìng)爭(zhēng)性置換的溫和條件從鏈霉親和素親和樹(shù)脂中容易且特異性地洗脫。對(duì)于生物樣品的下拉測(cè)定實(shí)驗(yàn)，脫硫生物素的這種軟釋放特性還有助于最大限度地減少內(nèi)源性生物素化分子的共純化，這些分子在目標(biāo)蛋白復(fù)合物與游離生物素洗脫后仍與鏈霉親和素結(jié)合。改良的親和素-生物素親和系統(tǒng)還消除了使用可能使復(fù)合物解離和/或損壞靶蛋白或細(xì)胞的苛刻洗脫條件的需要。
用磷化氫試劑標(biāo)記疊氮化物基團(tuán)可以通過(guò) 用天然存在的代謝構(gòu)件的疊氮化物衍生物進(jìn)行體內(nèi)
標(biāo)記而被引入蛋白質(zhì)或其他細(xì)胞靶標(biāo) 中。因?yàn)殪⒑童B氮化物是外來(lái)的并且對(duì)生物系統(tǒng)不可見(jiàn)（生物正交），它們包含用于標(biāo)記和綴合的化學(xué)選擇性（相互特異性）連接對(duì)。