產品概述:
固定化 TCEP 二硫化物還原凝膠無需使用費力且低效的凝膠過濾方法從還原劑中分離還原樣品。固定化 TCEP 二硫化物還原凝膠可以便利地適應各種規模和形式(即:批量、離心柱和重力流柱程序)。這種還原凝膠適用于一次性應用;不可再生和重復使用。
固定化 TCEP 二硫化物還原凝膠的特點:
?無味—在實驗臺上還原蛋白質;有助于保持更健康的實驗室環境
? 穩定—冷藏儲存時幾乎無活性損失
? 通用—可在多種 pH 值、鹽或去污劑濃度及溫度條件下還原肽和蛋白質
? 靈活—樹脂漿可靈活用于離心管、色譜柱或批量模式
? 節約時間—無需去除可溶性還原劑,能夠節約時間并節省樣品
? 高效—可裂解天然二硫鍵和通過交聯結合的二硫鍵
與可溶性二硫化物還原劑相比的優勢:
?不含還原劑的出色回收—去除還原劑和回收還原分子而無樣品損失是 DTT 或 β-巰基乙醇 (BME) 固有的問題。固定化 TCEP 可讓您以高得率(85% 或更高)回收還原蛋白質/肽,而無需透析或脫鹽。
?無味—與 DTT 或 BME 不同,固定化 TCEP 無味,因此可在實驗臺上便利地進行還原。
?空氣中性質穩定—鑒于 TCEP 的固有穩定性,在處理、使用或儲存固定化 TCEP 二硫化物還原凝膠時無需采取避免氧化的特殊預防措施。
?易于處理—固定化 TCEP 還原劑可讓您輕松分配每次應用所需的支持量。可在多種 pH 值(pH 值 4 至 9)和溫度(5 至 95°C)條件下進行還原。
三烷基膦是用于對蛋白質、肽和其他含二硫鍵分子進行二硫鍵還原的優良試劑 [1,2],對其他官能團相對無反應性。[3] 三烷基膦 TCEP 在水溶液中性質穩定,不會發生在使用其他還原劑(例如二硫蘇糖醇 (DTT) 和 β-巰基乙醇 (BME))時經常發生的快速氧化。[4] TCEP 不會干擾常用的巰基反應性試劑(例如馬來酰亞胺交聯劑)。[5] 然而,許多方案要求回收與還原劑分離的還原樣品。固定化 TCEP 二硫化物還原凝膠能夠進行樣品還原并即時回收不含還原劑的還原樣品。
固定化 TCEP 二硫化物還原凝膠的使用注意事項:
? 可在多種 pH 值(pH 值 4.0-9.0)和溫度 (5°-95°C) 條件下進行還原。
? 無需使用變性劑即可高效還原大多數蛋白質。然而,加入變性劑(如鹽酸胍)可能有助于將內部二硫化物暴露于固定化 TCEP。·
?不推薦將尿素用作變性劑,因為它會形成與巰基發生反應的氰酸鹽。
?請勿使金屬接觸固定化 TCEP,因為這會降低其活性。
?在還原過程中,向樣品緩沖液中加入 5—20 mM EDTA 有助于防止二價金屬(如 Zn 2+、Cu 2+ 和 Mg 2+)對巰基進行再氧化。
?還原樣品應在還原后立即使用,因為二硫化物會隨時間重新形成。